Molecular Evidence of Rickettsia felis in Phereoeca sp / Evidência Molecular de Rickettsia felis em Phereoeca sp

Abstract Rickettsia felis is an obligate intracellular bacterium capable of infecting ticks, fleas, lice, and other arthropods. This bacterium is classified as a member of the Transitional Group (TRG) Rickettsia. It is known the evidence of R. felis mutualistic and obligatory relationship with some eukaryote organisms. However, there aren't scientific accounts of R. felis and moths of the order Lepidoptera association. The current work reports the first identification of the bacteria R. felis in Phereoeca sp. For that, a polymerase chain reaction (PCR) assay using gltA, ompA, and ompB genes was used. The nucleotide sequences showed 100% of identity with other Rickettsia felis sequences. The genus-level identification of the moth larvae was performed by morphological taxonomic keys and PCR analysis of the cytochrome oxidase I (COI) gene. The nucleotide sequenced showed 94.94% similarity with the species Phereoeca praecox. However, with the low number of sequences deposited in the databases, the species was classified as Phereoeca sp. The results suggest that R. felis may develop in an organism without blood-feeding behavior (Lepidoptera), as it has been demonstrated for booklice (Psocoptera). Further investigation is necessary in order to confirm pathogenic or mutualistic association with moths.

Resumo Rickettsia felis é uma bactéria intracelular obrigatória capaz de infectar carrapatos, pulgas, piolhos e outros artrópodes. Essa bactéria é classificada como um membro do Grupo de Transição (TRG). Há evidência de que R. felis está relacionada a alguns organismos eucariotos em um relacionamento mutualístico e obrigatório. No entanto, nenhum relato científico mostra alguma relação entre R. felis e traças da ordem Lepidoptera. O presente trabalho relata a primeira identificação da bactéria R. felis em Phereoeca sp. Para isso, empregou-se um ensaio de reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando-se os genes gltA, ompA e ompB. As sequências nucleotídicas mostraram 100% de identidade com outras sequências de Rickettsia felis. Utilizando-se chaves taxonômicas morfológicas e análise por PCR do gene da citocromo oxidase I (COI) foi feita a identificação em nível de espécie da forma jovem das traças. O nucleotídeo sequenciado mostrou 94,94% de similaridade com a espécie Phereoeca praecox. Entretanto, com o baixo número de sequências depositadas nos bancos de dados, a espécie foi classificada como Phereoeca sp. Os resultados sugerem que R. felis pode se desenvolver em um organismo sem alimentação de sangue (Lepidoptera), assim como tem sido demonstrado para a espécie Liposcelis bostrychophila (Psocoptera). Mais investigações são necessárias para confirmar uma possível associação patogênica ou mutualística com traças.

Soroprevalência de anticorpos homólogos anti-Borrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil / Seroprevalence of homologous antiBorrelia burgdorferi antibodies in horses of military use in Brazil

A maioria das atividades de treinamento militar transcorre em ambiente de risco para aquisição de doenças de transmissão vetorial, incluindo importantes zoonoses e doenças emergentes/reemergentes. O objetivo deste estudo foi relatar a ocorrência de anticorpos homólogos da classe IgG anti-Borrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil, assim como analisar os fatores de risco associados à soropositividade nos animais. Foram estudados dois plantéis de equinos, sendo um no município de Resende, estado do Rio de Janeiro, tendo sido encontrada prevalência de 29,9%, e outro no município de São Borja, estado do Rio Grande do Sul, com prevalência de 44,7%, totalizando 474 animais e prevalência de 39,24%. Na análise dos fatores de risco associados, observou-se que a infestação por carrapatos constituiu-se no fator de risco para a soropositividade. A evidência de circulação de Borrelia spp. com soroprevalência nos equinos reforça seu papel como sentinela, sendo fator de alerta para potencial ocorrência de casos humanos. Os resultados obtidos reforçam a importância da vigilância epidemiológica dos carrapatos vetores e sua associação tanto com agentes infecciosos de risco para a saúde do efetivo militar humano, como nos equinos de uso militar nas regiões avaliadas. Isto também realça a necessidade da adoção de medidas de proteção coletivas e individuais visando mitigar o risco de doenças transmitidas por carrapatos em atividades militares.

Morphological and molecular diagnosis of Pseudoterranova decipiens (sensu stricto) (Anisakidae) in imported cod sold in Brazil / Diagnose morfológica e molecular de Pseudoterranova decipiens (sensu stricto) (Anisakidae) em bacalhau importado vendido no Brasil

An anisakid nematode larva found in cod sold in the state of Minas Gerais, Brazil was studied by light and scanning electron microscopy and by a molecular approach. Mitochondrial cytochrome c-oxidase subunit 2 (mtDNA cox-2), 28S rRNA and ITS1, 5.8S and ITS2 regions were amplified using the polymerase chain reaction and sequenced to evaluate the phylogenetic relationships of the larva. The genetic profile confirmed that this larva belongs to the species Pseudoterranova decipiens (sensu stricto). This is the first molecular and ultrastructural study of Pseudoterranova decipiens (sensu stricto) in imported cod sold in Brazil. The health implications of these findings are discussed.

Uma larva de Nematoda anisakídeo encontrada em bacalhau comercializado no Estado de Minas Gerais, Brasil foi estudada por microscopias de luz e eletrônica de varredura e por uma abordagem molecular. As regiões da subunidade 2 da citocromo c-oxidase mitocondrial (mtDNA cox-2), 28S rRNA e ITS1, 5.8S e ITS2 foram amplificadas usando a reação em cadeia da polimerase e sequenciadas para avaliar as relações filogenéticas da larva. O perfil genético confirmou que esta larva pertence à espécie Pseudoterranova decipiens (sensu stricto). Esse é o primeiro estudo molecular e ultraestrutural de Pseudoterranova decipiens (sensu stricto) de bacalhau importado vendido no Brasil. As implicações destes resultados para a saúde são discutidas.

Occurrence of Ehrlichia canis in free-living primates of the genus Callithrix / Ocorrência de Ehrlichia canis em primatas de vida livre pertencentes ao gênero Callithrix

Bacteria of the genus Ehrlichia are Gram-negative and coccoid-shaped microorganisms that cause ehrlichiosis a serious infectious disease that often leads to death. These bacteria present a strong zoonotic potential and primates may act as reservoir hosts. This study involved a molecular analysis to detect these microorganisms in blood samples collected from nineteen primates of the genus Callithrix living free in an Atlantic Forest fragment in the municipality of Viçosa, state of Minas Gerais, Brazil. One of the 19 primates was found to be infected with Ehrlichia canis. This finding points to a new wild host of E. canis with a strong potential for transmission to humans because of its increasing contact with people. This is the first report of Ehrlichia spp. in primate of the genus Callithrix.

Bactérias do gênero Ehrlichia são gram-negativas em forma de cocos. Provocam uma doença infecciosa grave denominada erliquiose que, muitas vezes, causa morte. Essas bactérias apresentam grande potencial zoonótico, e os primatas podem agir como reservatórios. Este estudo objetivou a detecção molecular desse microorganismo em amostras de sangue coletadas de dezenove primatas de vida livre num fragmento de Mata Atlântica pertencentes ao gênero Callithrix, no município de Viçosa, Minas Gerais, Brasil. Entre os 19 espécimes de sagui, um estava infectado com Ehrlichia canis. Esse achado aponta para um novo hospedeiro selvagem para E. canis com grande potencial de transmissão ao homem, devido ao seu crescente contato com pessoas. Este é o primeiro relato de primata do gênero Callithrix infectado com Ehrlichia spp.

Evidence of Borrelia in wild and domestic mammals from the state of Minas Gerais, Brazil / Evidência de Borrelia em mamíferos silvestres e domésticos no Estado de Minas Gerais, Brasil

The main of the study was to evaluate the presence of Borrelia burgdorferi infection in domestic and wild vertebrates and ectoparasites in endemic areas from the state of Minas Gerais, Brazil. A total of 445 serum samples were examined by ELISA, which used the Borrelia burgdorferi strain G39/40 U.S. source and 3,821 tick samples were tested by polymerase chain reaction (PCR). B. burgdorferi antibodies were found in 30 serum samples (6.74%); three in marsupials (7.69%), three in rodents (2.80%), nine in dogs (6.25%), and 15 in horses (9.68%). Nested-PCR performed in DNA samples obtained from collected ticks demonstrated negative results. Although attempts to amplify B. burgdorferi DNA from ticks had been not successful, the presence of seroreactive vertebrates suggests the possibility the Borrelia species circulating in these regions. Further research is required to provide information on the presence of Borrelia in Brazilian territory and its association with Baggio-Yoshinari syndrome.

O principal objetivo do estudo foi avaliar a presença de infecção por Borrelia burgdorferi em vertebrados domésticos e silvestres e ectoparasitas em áreas endêmicas do estado de Minas Gerais, Brasil. Um total de 445 amostras de soro foram examinadas por ELISA, onde usou-se a cepa americana G39/40 de Borrelia burgdorferi e 3.821 amostras de carrapatos foram testados pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Anticorpos anti -B. burgdorferi foram encontrados em 30 amostras de soro (6,74%); três marsupiais (7,69%), três em roedores (2,80%), em nove cães (6,25%) e 15 em cavalos (9,68%). Nested-PCR realizada em amostras de DNA obtidas a partir de carrapatos coletados demonstraram resultados negativos. Apesar das tentativas para amplificar o DNA de B. burgdorferi a partir de carrapatos não tenha sido bem sucedido, a presença de soroatividade em vertebrados sugere a possibilidade de espécies de Borrelia circulando nestas regiões. Mais pesquisas são necessárias para fornecer informações sobre a presença de Borrelia em território brasileiro e sua associação com a Síndrome de Baggio-Yoshinari.

First occurrence of Amblyomma ovale in the State of Rio Grande do Norte, Brazil / Primeira ocorrência de Amblyomma ovale no Estado do Rio Grande do Norte, Brasil

This study aims to report the occurrence of parasitism by Amblyomma ovale (Koch, 1844) in dogs in the municipality of Apodi, Rio Grande do Norte, Brazil. Specimens were identified as being one female and two males of A. ovale, besides; the animal was infested by five females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus and seven females and three males of R. sanguineus. The finding of A. ovale confirms results in the literature that these ticks, reported in several species of wild carnivores, can also infect dogs in Brazil. The distribution of this tick species in several Brazilian states has already been confirmed, but this is the first report in the State of Rio Grande do Norte. This finding highlights the risk of the carrying of emerging and re-emerging pathogens to peridomestic hosts are as, either because of the frequency of these ticks in wild environments or the presence of infected wild animals near peridomestic environments, exposing domestic dogs to parasitism by A. ovale ticks and, therefore, to agents potentially carried by this ectoparasite.

O presente estudo objetiva comunicar a ocorrência do parasitismo por Amblyomma ovale (Koch, 1844) em cão, no município de Apodi, Rio Grande do Norte, Brasil. Os exemplares foram identificados como sendo uma fêmea e dois machos de A. ovale, além destes, o animal estava parasitado por cinco fêmeas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus, sete fêmeas e três machos de R. sanguineus. O encontro de A. ovale confirma os resultados da literatura de que esses carrapatos, relatados em várias espécies de carnívoros silvestres, também podem infestar cães no Brasil. Este carrapato tem sua distribuição confirmada em vários estados brasileiros, sendo este o primeiro relato no Estado do Rio Grande do Norte. Este achado alerta para o risco do carreamento de patógenos emergentes e re-emergentes para regiões peridomiciliares, seja devido a frequência destes carrapatos em ambientes silvestres ou da presença de animais silvestres parasitados próximos a ambientes peridomiciliares, expondo cães domésticos ao parasitismo por carrapatos A. ovale e, consequentemente, a agentes potencialmente veiculados por este ectoparasito.

Amblyomma nodosum (Acari: Ixodidae) parasitizing a domestic dog in Colatina, Espírito Santo, Brazil / Carrapato Amblyomma nodosum (Acari: Ixodidae) parasitando cão em um domicílio de Colatina, Espírito Santo, Brasil

On 27 Jan 2011 an adult Amblyomma nodosum tick was found attached to a domestic dog from the municipality of Colatina, state of Espírito Santo, Brazil. This is the first report of this tick species in this state and the second time it has been reported parasitizing a domestic dog in the country. For the time being, this finding should be regarded as incidental. However, more in-depth research into the hosts and ecology of A. nodosum is needed, since it has been associated to infectious agents that are potentially pathogenic for humans.(AU)

Em 17 de janeiro de 2011 um carrapato adulto de Amblyomma nodosum foi encontrado parasitando um cão doméstico no município de Colatina, Espírito Santo, Brasil. Esta é a primeira vez que esta espécie de carrapato foi descrita no Estado e pela segunda vez no país parasitando um cão doméstico. Este achado por ora deve ser considerado fortuito. Entretanto, a busca por informações adicionais sobre hospedeiros e ecologia do A. nodosum é recomendada uma vez que este parasito já foi associado a agente infeccioso potencialmente patogênico para seres humanos.(AU)

Rickettsial spotted fever in capoeirão Village, Itabira, Minas Gerais, Brazil / Rickettsiose do grupo da febre maculosa na Vila de Capoeirão, Itabira, Minas Gerais, Brasil

The present study investigated the infection by spotted fever rickettsia in an endemic area for Brazilian spotted fever (BSF; caused by Rickettsia rickettsii) in Minas Gerais State, Brazil. Human, canine and equine sera samples, and Amblyomma cajennense adult ticks collected in a rural area of Itabira City, Minas Gerais State were tested for rickettsial infection. Through Immunofluorescence Assay (IFA) we demonstrated the presence of antibodies anti-R. rickettsii in 8.2 percent, 81.3 percent and 100 percent of the human, canine and equine sera, respectively. None of the 356 tick specimens analyzed were positive for Rickettsia by the hemolymph test or Polymerase Chain Reaction technique (PCR) for the htrA and the gltA genes. Our serological results on horses and dogs (sentinels for BSF) appoint for the circulation of a SFG Rickettsia in the study area, however in a very low infection rate among the A. cajennense tick population.

O presente estudo investigou a infecção por rickéttsias do grupo da febre maculosa (GFM) em área endêmica para febre maculosa brasileira (FMB; causada por Rickettsia rickettsii) no Estado de Minas Gerais, Brasil. Amostras de soros de humanos, cães e eqüídeos, e carrapatos Amblyomma cajennense adultos colhidos em um povoado rural em Itabira, Minas Gerais foram testados para infecção por Rickettsia. Pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) foram detectados anticorpos anti-R. rickettsii em 8,2 por cento dos soros humanos, 81,3 por cento dos cães e em 100 por cento dos eqüídeos. Nenhum dos 356 carrapatos se mostrou positivo para Rickettsia no teste de hemolinfa e na reação em cadeia pela polimerase (PCR) objetivando amplificar fragmentos de DNA dos genes htrA and the gltA. Os resultados sorológicos em eqüinos e cães (sentinelas para FMB) apontam para a circulação de uma rickéttsia do GFM na área do estudo, porém, numa freqüência de infecção muito baixa na população do carrapato A. cajennense.

Caracterizacão de Rickettsia spp. circulante em foco silencioso de febre maculosa brasileira no Município de Caratinga, Minas Gerais, Brasil / Characterization of Rickettsia spp. circulating in a silent peri-urban focus for Brazilian spotted fever in Caratinga, Minas Gerais, Brazil

O objetivo deste trabalho foi caracterizar Rickettsia spp. circulante em artrópodes vetores no Município de Caratinga, Minas Gerais, Brasil, por meio da PCR, e investigar a presenca de anticorpos para riquétsias do grupo da febre maculosa em cães e eqüinos. 2.610 ectoparasitos foram coletados e identificados taxonomicamente. Amostras de DNA obtidas desses vetores foram submetidas à PCR e seqüenciamento. Em pulgas do gênero Ctenocephalides e em carrapatos Amblyomma cajennense foram identificadas seqüências com 100 por cento de homologia com R. felis. Em carrapatos Rhipicephalus sanguineus uma seqüência apresentou 99 por cento de homologia com R. felis e uma seqüência obtida de A. cajennense apresentou 97 por cento de homologia com R. honei e R. rickettsii. Soros de cães (73) e de eqüinos (18) foram submetidos à imunofluorescência indireta (RIFI) usando-se antígeno de R. rickettsii. Apenas três dos soros de eqüinos (17 por cento) mostraram-se positivos. A deteccão molecular de riquetsias potencialmente patogênicas ao homem em vetores e a presenca de sororeatividade para riquetsias do grupo da febre maculosa em eqüinos, demonstram o risco de transmissão de riquetsioses nessa área e a necessidade de se manter um sistema contínuo de vigilância epidemiológica.

Human ehrlichioses in Brazil: first suspect cases

Brazilian spotted fever (BSF) rickettsiosis is the most common and recognized of the human rickettsioses in Brazil. It is difficult to establish the diagnosis of human rickettsiosis infection by routine microbiologic methods, creating a false idea that Rickettsia and Ehrlichia infections are rare and without importance. New tick-borne diseases, like Human Granulocytic Anaplasmosis (HGA) and Human Monocytic Ehrlichiosis (HME), have been described in many countries. These diseases can present symptoms similar to rickettsioses of the spotted fever group, and they are transmitted by ixodid ticks. The first two suspected cases of human ehrlichiosis in Brazil were first considered to be cases of BSF. The differential diagnosis was made at the Minas Gerais Rickettsiosis Public Health Laboratory. The clinical and laboratory findings, with positive serology for the HME agent, indicated suspected cases of human ehrlichioses in Brazil.

Clinical and laboratorial evidence of Rickettsia felis infections in Latin America

Depois da descoberta e caracterização inicial da Rickettsia felis em 1992 por Azad e cols, e à descrição subseqüente do primeiro caso de infecção humana em 1994, houveram duas comunicações de rickettsioses causadas por Rickettsia felis na América Latina. A primeira foi feita por Zavala-Velazquez e cols em 2000 no México. Em 2001, Raoult e cols descreveram a ocorrência de dois casos humanos de rickettsiose por Rickettsia felis no Brasil. Na presente discussão, esses dois artigos foram comparados, e depois da descrição dos principais sinais e sintomas, conclui-se que outros estudos são necessários, com a participação de um maior número de pacientes, para se estabelecer a verdadeira freqüência dos sinais clínicos e sintomas presentes nas rickettsioses por Rickettsia felis.

Rickettsioses emergentes e reemergentes numa regiäo endêmica do Estado de Minas Gerais, Brasil / Emerging and reemerging rickettsiosis in an endemic area of Minas Gerais State, Brazil

O trabalho descreve um inquérito sorológico para rickettsioses em escolares e cäes de Novo Cruzeiro, Minas Gerais, Brasil, em 1998. Trezentos e trinta e um escolares pertenciam a uma área endêmica e 142 a uma área näo endêmica do município. Trinta e nove (10,1 por cento) soros foram reativos à Reaçäo de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para Rickettsia rickettsiino título de 1:64, sendo que dentre esses reativos, 35 eram de estudantes de escolas de área endêmica. Dentre os 73 cäes analisados quanto à presença de anticorpos anti R. rickettsii, anti Ehrlichia chaffeensise anti Ehrlichia canisà RIFI no título de 1:64, 3 (4,11 por cento), 11 (15,07 por cento) e 13 (17,81 por cento) desses animais foram reativos respectivamente aos antígenos testados. Conclui-se que, a sororeatividade para R. rickettsiiem indivíduos sadios sem história prévia de febre maculosa brasileira, uma doença marcante por sua alta letalidade, e a presença de sororeatividade para Ehrlichiacom potencial patogênico para o homem em cäes, nos leva a indagar sobre a transmissäo ao homem de outras espécies da família Rickettsiae na área estudada